Microscopes d'imagerie numérique (DIM)

Microscopes d'imagerie numérique (DIM)

Les DIM offrent d'autres méthodes d'imagerie d'échantillons biologiques, avec les avantages d'un faible photoblanchiment, d'une grande efficacité photonique et d'un coût relativement bas. En combinaison avec la déconvolution, une imagerie haute résolution peut être réalisée sur ces systèmes.

La plateforme compte 6 postes DIM. Chacun se distingue des autres par sa configuration logicielle et matérielle selon ses usages principaux :

• Postes DIM 1-4 : équipés de Metamorph (Universal Imaging Corp , Molecular Devices), d'une caméra CCD refroidie et sensible (Sensicam de chez Optikon , Cascade II EMCCD ou CoolSnapHQ (Photometrics)) et d'un microscope Zeiss (AxioImagerZ, Axioplan IIM ou Axiovert 200M). Tous sont munis d'optiques DIC (contraste interférentiel différentiel) et d'optiques de fluorescence. Ces postes sont principalement configurés pour la vidéomicroscopie de fluorescence à faible intensité. Tous ces microscopes numériques peuvent réaliser la détection à plusieurs longueurs d'onde, l'acquisition tridimensionnelle et des expériences en accéléré (time-lapse) 3D. Un poste est doté des roues à filtres nécessaires pour l'imagerie ratiométrique Ca/pH et l'analyse FRET avec les paires de fluorophores CFP et YFP. Il dispose également d'un contrôle d'environnement pour cellules vivantes permettant des expériences en accéléré de longue durée (plusieurs jours).

• Poste DIM 5 : composé d'un Axioscope 2 de Zeiss pour l'examen de fluorescence de routine et d'une caméra couleur numérique haute résolution (Axiocam HR, Zeiss) pour la photographie numérique couleur.

• Poste DIM 6 : composé d'un Zeiss Axiovert 100M, d'une caméra CCD refroidie (Sensicam HE) et du logiciel Metamorph. La principale différence réside dans son système de micro-injection Eppendorff qui permet d'injecter de petites quantités de molécules dans des cellules adhérentes. Le système est également accessible pour l'imagerie de fluorescence de routine.

• Poste DIM 7 : doté d'un microscope inversé à fluorescence (Olympus IX70) et d'une Zeiss Axiocam pour l'examen de routine des échantillons ainsi que la documentation. Il peut aussi réaliser de l'imagerie en accéléré en fond clair (avec optiques de contraste de phase) au besoin.

Référence : http://www.graduate-studies-in-cancer-research.org/CIF/CIFequip4.htm