Conditions de tri

Notre plateforme propose quatre conditions de tri différentes pour s'adapter à divers types cellulaires :

📌 70 µm / 70 PSI - Pour splénocytes, thymocytes, PBMC, sang total et cellules de moelle osseuse

📌 85 µm / 45 PSI - Pour lignées cellulaires B ou T transfectées, lymphocytes primaires et cellules de moelle osseuse

📌 100 µm / 20 PSI - Pour fibroblastes, cellules primaires en culture, cellules endothéliales et lignées cellulaires adhérentes

📌 130 µm / 16 PSI - Pour cellules tumorales dissociées, lignées de grandes cellules et cellules fragiles

📌 Tampon de tri de base

Préparez vos échantillons dans du PBS ou HBSS 1X (sans Ca²⁺/Mg²⁺) avec 1% de FBS et 1 mM d'EDTA.

🔹 Modifications selon les types cellulaires particuliers :

✔️ Cellules adhérentes/collantes - Augmenter l'EDTA à 5 mM pour réduire les amas.

✔️ Cellules sensibles - Ajouter 25 mM de HEPES pour stabiliser le pH.

✔️ Échantillons avec mortalité cellulaire élevée - Ajouter de la DNAse pour prévenir l'agrégation.

Collecte des échantillons

Les cellules peuvent être récoltées dans divers types de tubes ou de plaques :

• Tubes Eppendorf
• Tubes FACS de 5 ml (idéalement en polypropylène car les cellules y adhèrent moins que dans le polystyrène)
• Tubes coniques de 15 ml (tri 2 voies seulement)
• Plaques multipuits (6, 12, 24, 48, 96, 384) (tri 1 voie seulement)
• Lames (tri 1 voie seulement)

Tapissez le tube ou la plaque de récupération avec du milieu ou du PBS avant votre arrivée. Vous pouvez ajouter environ 10 à 20% du volume du récipient (p. ex. 2 ml dans un tube conique de 15 ml). Songez à ajouter une concentration plus élevée de FBS dans le milieu de récupération pour les échantillons sensibles.

Les tubes de collecte peuvent également être maintenus à 4°C pendant le tri. Vous pouvez décider de la température de collecte le jour de votre tri et en aviser l'opérateur.