Cette ressource numérique est un manuel complet de Roche détaillant les protocoles d'hybridation in situ (ISH) non radioactive. Les méthodes d'ISH non radioactives offrent une alternative plus sûre et souvent plus rapide à l'ISH radioactive classique, grâce à des systèmes de détection chromogéniques ou fluorescents. Ce manuel fournit des directives détaillées aux chercheurs pour réaliser des expériences d'ISH sans recourir aux isotopes radioactifs. Le guide aborde plusieurs aspects de l'ISH non radioactive, notamment la préparation des échantillons (fixation des tissus, coupe), le marquage des sondes (p. ex., avec la digoxygénine ou la biotine), les conditions d'hybridation, les étapes de lavage et la détection du signal à l'aide d'anticorps conjugués à des enzymes ou de streptavidine. Il comprend des conseils de dépannage et des stratégies d'optimisation afin d'assurer une détection sensible et efficace des acides nucléiques cibles (ARNm ou ADN) dans les cellules et les tissus. Les chercheurs en biologie moléculaire, en biologie du développement et en pathologie peuvent en tirer un grand bénéfice. Il leur permet de visualiser les profils d'expression génique ou de localiser des séquences d'ADN précises avec une haute résolution spatiale, offrant des données cruciales sur le fonctionnement cellulaire et les mécanismes pathologiques. L'approche non radioactive rend cette technique plus accessible et adaptée à un usage courant en laboratoire. Conçu par Roche, une référence majeure en sciences de la vie, ce manuel propose des protocoles validés et fiables reflétant les meilleures pratiques du domaine. Il constitue une référence essentielle pour les laboratoires souhaitant mettre en oeuvre ou optimiser les techniques d'hybridation in situ non radioactives, garantissant des résultats robustes et reproductibles.