L'article scientifique intitulé « Two-photon absorption properties of fluorescent proteins », publié dans la revue Nature Methods, constitue une ressource numérique essentielle pour les chercheurs utilisant l'excitation à deux photons en imagerie biologique. Cette publication offre une revue complète et une caractérisation systématique des propriétés d'absorption à deux photons (2PA) d'un large éventail de protéines fluorescentes. L'article vise à guider les chercheurs dans le choix des protéines fluorescentes les plus adaptées et les plus brillantes, ainsi que de leurs longueurs d'onde d'excitation optimales, pour diverses applications de microscopie à deux photons. Il couvre à la fois les variants établis et plus récents, y compris les protéines fluorescentes dans le rouge lointain, en fournissant une analyse comparative utile de leurs caractéristiques photophysiques. Il détaille les avantages majeurs de la microscopie à balayage laser à deux photons (2PLSM), comme la réduction du photoblanchiment hors plan focal, la diminution de l'autofluorescence, une pénétration tissulaire plus profonde et une résolution tridimensionnelle intrinsèquement élevée. Ces atouts font de la 2PLSM un outil puissant pour l'étude de systèmes biologiques complexes, en particulier chez les organismes vivants. En présentant des données détaillées sur les spectres 2PA et les valeurs de section efficace, cette publication permet aux chercheurs de faire des choix éclairés pour la conception et l'optimisation de leurs expériences. Il s'agit d'une référence incontournable pour quiconque s'intéresse à la microscopie avancée, à la bio-imagerie et au développement de nouvelles sondes fluorescentes pour la recherche biologique de pointe.