Histology and Light Microscopy Core

Histologie. Traitement de tissus fixés au formol et inclus en paraffine (FFPE) et congelés, inclusion, coupe, coloration et numérisation de lames entières. Les colorations comprennent l'H&E, l'hybridation in situ, TUNEL et des colorations spéciales : PAS, rouge à l'huile O, rouge Congo et trichrome de Masson.

Biologie spatiale. Visium de 10x, réalisé avec la Plateforme de génomique.

Microscopie, sur cellules vivantes et fixées. Confocale et super-résolution, à feuille de lumière avec clarification tissulaire pour l'imagerie volumétrique, numérisation automatisée de lames entières et champ large.

Analyse d'images. Imaris sur la station de travail Mammoth à la pièce 327, ImageScope, ImageJ et FIJI, OlyVia, ainsi qu'une station de travail du Gladstone Institute of Cardiovascular Disease.

L'UltraMicroscope Blaze permet l'imagerie 3D d'échantillons clarifiés, de l'organoïde à la souris adulte entière, rapidement et avec peu de photoblanchiment. Analysez ensuite les volumes dans Imaris sur la station de travail Mammoth de la plateforme.

Fixer d'abord. Tous les tissus doivent être fixés avant leur arrivée. La plupart des tissus réagissent bien à une perfusion fraîche, suivie de PFA à 4 pour cent ou de formol à 10 pour cent toute la nuit au réfrigérateur. Le cerveau et les os nécessitent plus de temps.

Pour la paraffine, rincez trois fois dans du PBS 1x après la fixation et conservez dans de l'éthanol à 70 pour cent, idéalement en passant d'abord par 25 et 50 pour cent.

Pour les coupes congelées, apportez les tissus dans du saccharose à 30 pour cent sur glace, ou dans des blocs d'OCT ou sur lames sur glace sèche. Pour Visium, consultez la plateforme avant de préparer quoi que ce soit.

Le dépôt et la collecte se font en personne, au local 367, entre 10 h et 15 h. La plateforme vous informe dès que vos échantillons sont prêts.

Le délai de traitement est habituellement de 15 à 20 jours ouvrables à compter du dépôt, une fois la demande complète. Les commandes urgentes prennent 4 jours ouvrables. Les projets volumineux ou complexes, ou une file d'attente chargée, peuvent prendre plus de temps.

Les articles ayant eu recours à la plateforme couvrent la neurodégénérescence, l'autisme, le développement cardiaque et le développement fœtal humain. Quelques exemples :

Tau reduction prevents key features of autism in mouse models. Neuron, 2020.

Microglial microRNAs mediate sex-specific responses to tau pathology. Nature Neuroscience, 2020.

Single-cell determination of cardiac microtissue structure and function using light sheet microscopy. Tissue Engineering Part C, 2020.

Single-cell analysis of cardiogenesis reveals basis for organ-level developmental defects. Nature, 2019.

L'onglet Publications en présente d'autres, chacun précisant le service utilisé.

Consultez le personnel avant de préparer vos échantillons, afin que vos réactifs soient compatibles avec les équipements de la plateforme.

Choisissez un service et cliquez sur Demander un service. Décrivez le tissu et vos besoins, et la plateforme vous proposera un plan de travail ainsi qu'un devis. Les chercheurs d'autres organismes sans but lucratif et d'entreprises doivent signer l'accord de services de laboratoire de la plateforme avant le premier projet. Le paiement s'effectue par bon de commande.

Pour utiliser vous-même les instruments, cliquez sur Demander une formation sur l'appareil. Certains équipements sont accessibles aux utilisateurs formés une fois que le personnel en a autorisé l'accès. Chaque utilisateur doit suivre une séance de formation initiale avant d'utiliser les instruments de la plateforme. La formation et l'assistance du personnel sont facturées à l'heure.

Mentionnez la plateforme. La plateforme applique les directives de l'ABRF en matière de paternité d'auteur : mentionnez-la si vos travaux ont fait appel à ses espaces, ses équipements, ses réactifs ou ses services, ou si son personnel a contribué à concevoir ou à réaliser les expériences.